全基因合成裡面包含基因合成/定點突變/基因選殖,一篇文章告訴你全部資訊

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全基因合成裡面包含基因合成/定點突變/基因選殖,一篇文章告訴你全部資訊

期望寡核苷酸質量和數量的平衡比例,因為與其他常規的基於寡核苷酸的應用相比,基因合成僅需要少量。縮減寡核苷酸的合成規模是降低基因合成成本的最有效方法之一,儘管當前基於亞磷酰胺的合成方法和保持高質量水平的要求限制了產量的減少和化學藥品的消耗。就生產規模而言,寡核苷酸合成的持續發展,特別是用於基因合成的,正在不斷發展,或者引入了針對不同應用開發的新方法,例如芯片合成技術。



根據所使用的技術,將這些基本成分組合成第一步合成DNA片段通常限於大約500-2000 bp。因此,對於較大的基因或較高階的複合物,需要後續的組裝步驟。同樣,組裝技術的龐大規模還在不斷發展。如今,大多數用戶使用基於PCR的技術(例如PCA:聚合酶鏈裝配),
全基因合成基於連接酶的(LCR),兩者的混合物或基於同源性的方法(SLIC:不依賴序列和連接的克隆; RED重組等) )。但是,以基本水平的精度執行大規模DNA合成的商業基因合成正在將基因工程從繁瑣的藝術轉變為工業,信息和技術驅動的學科。

預期驅動合成基因需求的合成生物學將挑戰現有的基因合成能力。因此,不足為奇的是,當前的化學DNA合成和基因組裝方法被旨在提供或擴展基因合成能力並同時降低生產成本的新工程工具,技術和趨勢所補充。其中一些進展包括從DNA微陣列合成寡核苷酸或使用微流體技術和多重基因合成技術。最近的發展以可靠性和過程穩定性以及簡化現有過程為目標,例如,通過引入智能錯誤糾正方法,減少和改進寡核苷酸組裝或提供組裝設備。

 
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